第二代试管婴儿技术(ICSI)最初应用于严重男性不育，由于ICSI受精率比常规IVF 高，其应用范围逐渐扩大，包括既往常规IVF受精失败，不明原因不育，甚至对于年龄大于38岁的妇女，但Bhattachrya近期报道对非男性因素的治疗却没有优越性。一些前瞻性研究认为，畸形子仍然以常规IVF为首选的治疗方法。
对常规IVF受精失败再次ICSI(Late ICSI)受精治疗，最终妊娠率低至极微，几乎等于零。其原因在于卵子老化或与种植窗不同步，目前大多数生殖医学中心已放弃使用。
昔日1995年Fishel首次报道圆形精细胞卵浆内注射(ROSI)受精获得妊娠成功，曾风行一时，但由于确认精细胞困难以及未成熟精子受精可能带来的基因缺陷难以估计，热度逐日下降。
第二代试管婴儿技术（ICSI）的安全性仍然受关注，因为非阻塞性无精症的染色体异常率高;另外，有推测睾丸精子在受精时染色体印迹并未完全结束，因此可能对受精和胚胎早期发育影响不大，但可能导致出生后的异常。比利时Brussels追踪调查了229个经ICSI和133个常规IVF出生的2岁幼儿，并未发现第二代试管婴儿技术（ICSI）的幼儿有智力发育慢的特点，但第二代试管婴儿技术（ICSI）的性染色非整倍体率和结构异常率有轻微的增高。
